Секвенування послідовностей rbcL та ITS2 антарктичних рослин для визначення можливості їх використання у ДНК-штрихкодуванні
- molecular taxonomy,
- DNA barcoding,
- Antarctic plants,
- in vitro culture
Анотація
Оптимізовано методику виділення загальної ДНК для ряду рослин Антарктики, що культивуються in vitro. Вивчено можливість застосування відповідних праймерів для ампліфікації ділянок хлоропластної і ядерної ДНК (trnH-psbA, rbcL, ITS2, ITS) рослин Антарктики Decshampsia antarctica E. Desv., Colobanthus quitensis (Kunth) Bartl., Warnstorfia fontinaliopsis (Müll.Hal.) Ochyra, Bryum pseudotriquetrum (Hedw.) G. Gaertn., B. Mey. & Scherb., Bryum archangelicum Bruch & Schimp. (2 зразки), Pohlia nutans (Hedw.) Lindb. з метою подальшого використання цих ділянок для ДНК-штрихкодування. Показано, що зазначені праймери можуть бути використані для ампліфікації гена rbcL та міжгенного спейсера ITS2 як судинних рослин, так і мохоподібних Антарктики. Секвеновано ампліфіковані ділянки гена rbcL та міжгенного спейсера ITS2, за сіквенсами цих ділянок один з досліджуваних зразків було визначено до виду, а три – до роду.
Посилання
- Zaxarov, I., Shajkevich, E., Ivshin, N. (2007). DNK-shtrixkodirovanie v e`ntomologii [DNA-barcoding in enthomology]. Priroda, 9, 3-9.
- Altschul, S., Gish, W., Miller, W. et al. (1990). Basic local alignment search tool. J. Mol. Biol., 215(3), 403-410.
- Chase, M., Cowan, R., Hollingsworth, P. et al. (2007). A proposal for a standardised protocol to barcode all land plants. Taxon, 56, 295–299.
- Chen, S., Yao, H., Han, J. et al. (2010). Validation of the ITS2 region as a novel DNA barcode for identifying medicinal plant species. PLoS One, 5(1), e8613.
- Chiou, S.J., Yen, J.H., Fang, C.L. et al. (2007). Authentication of medicinal herbs using PCR-amplified ITS2 with specific primers. Planta Med., 73, 1421–1426.
- Gao, T., Sun, Z., Yao, H. et al. (2011). Identification of Fabaceae Plants Using the DNA Barcode matK. Planta Med., 77(1), 92-94.
- Hebert, P., Cywinska, A., Ball, S. et al. (2003a). Biological identifications through DNA barcodes. Proc. R. Soc. Lond. B Biol. Sci., 270, 313–322.
- Hebert, P., Ratnasingham, S., & de Waard, J. (2003b). Barcoding animal life: cytochrome c oxidase subunit 1 divergences among closely related species. Proc. R. Soc. Lond. B Biol. Sci., 270(Suppl.), S596–S599.
- Hollingsworth, P., Forrest, L., Spouge, J. et al. (2009). A DNA barcode for land plants. PNAS, 106(31), 12794–12797.
- Kress, W., Wurdack, K., Zimmer, E. et al. (2005). Use of DNA barcodes to identify flowering plants. PNAS, 102(23), 8369–8374.
- Kress, W.J., & Erickson, D.L. (2007). A two-locus global DNA barcode for land plants: The coding rbcL gene complements the non-coding trnH-psbA spacer region. PLoS ONE, 2(6), e508.
- Lee, H.-L., Yi, D.-K., Kim, J.-S., & Kim, K.-J. (2007). Development of plant DNA barcoding markers from the variable noncoding regions of chloroplast genome. In: Second International Barcode of Life Conference. Academia Sinica, Taipei, Taiwan,18-20 September, 2007. – p. 23.
- Murashige, T., & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue culture. Phys. Plant, 15(3), 473-497.
- Tamura, K., Peterson, D., Peterson, N. et al. (2011). MEGA5: Molecular Evolutionary Genetics Analysis using Maximum Likelihood, Evolutionary Distance, and Maximum Parsimony Methods. In: Molecular Biology and Evolution, 28, 2731-2739.
- White, T., Bruns, T., Lee, S. et al. (1990). Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. In M. Innis, D. Gelfand, J. Sninsky, T. White (Eds.), PCR protocols: A guide to methods.